چربی‌‌های دخیره‌ای قابل استفاده شترمرغ در ناحیه زیر جلدی خصوصاً در لایه چربی که اطراف حفره شکمی را پوشانده است قرار دارند. مهم‌ترین فاکتورهای این چربی درجه خلوص آن یعنی بدون گوشت و خون بودن آن می‌باشد. پس از مراحل سلاخی و پرکنی دستی چربی از ناحیه صفاق جانور جدا شد. کلیه حلال‌های مورد نیاز جهت استخراج و متیلاسیون از شرکت merc و sigma aldrichخریداری شدند. کارهای انجام شده برای بررسی چربی به ۳ مرحله مجزا تقسیم می‌شوند:

( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. )

۱) استخراج چربی از بافت
۲) متیلاسیون چربی برای تزریق به دستگاه GC /MASS
۳) تزریق چربی متیله شده به دستگاه GC /MASS
تمام وسایل استفاده شده از جمله وسایل شیشه‌ای مانند بشر، ارلن، پیپت، بالن، روتاری و مبردهای شیشه‌ای ابتدا با آب و مایع ظرفشویی شستشو داده شده‌اند و سپس با استن آب‌زدایی گردیدند. (۱۵)
۳-۳-۲. استخراج چربی از بافت
استخراج با بهره گرفتن از روش گداخت مرطوب
در این روش ۱ کیلوگرم بافت حاوی چربی جدا و وزن شد. سپس بوسیله هموژنایزر بطور کامل خرد شده و در یک اتوکلاو قرار داده شد و سپس تزریق بخار آب انجام شد پس از خروج هوای داخل اتوکلاو که با خروج بخار پایان این مرحله مشخص می‌شود چربی‌ها به مدت ۱-۲-۳ ساعت در داخل دیگ برای استخراج چربی بخار دهی شدند پس از پایان مرحله با بهره گرفتن از سانتریوفیوژ چربی از فاز آبی جداسازی شد و روغن حاصله برای خارج سازی رطوبت برای مدت ۴ ساعت در آون خلاء قرار داده شد تا رطوبت موجود در آن که از طریق سانتریوفیوژ جداسازی شده است خارج گردد. (۵۲)
۳-۳-۳. متیلاسیون چربی برای تزریق به دستگاه GC/ MASS
برای تهیه متیل استرهای اسیدهای چرب روغن شترمرغ، مقدار ۲۰ میلی‌گرم روغن در یک بالن سر سمباده‌ای توزین شد. مقدار ۲ میلی‌لیتر سود متانولی (۵/۰ مول در لیتر) نیز به آن افزوده شد مخلوط به مدت ۷ دقیقه در ۱۰۰ درجه سانتی‌گراد حرارت داده شد پس از سرد کردن مخلوط، ۳ میلی‌لیتر محلول ۱۴ درصد از BF3-Methanol افزود درب لوله را بسته و ۵ دقیقه در ۱۰۰ درجه سانتی‌گراد حرارت داده شد. پس از سرد شدن ۲ میلی‌لیتر هگزان و ۷ میلی‌لیتر آب نمک اشباع به آن اضافه و به شدت مخلوط شد. در این مرحله دو فاز تشکیل می‌شود لایه هگزان (فاز بالایی) جدا و تحت گاز نیتروژن حلال هگزان تبخیر شد.
۳-۳-۴. تزریق چربی متیله به دستگاه GC/ MASS
برای تزریق به دستگاه GC /MASSابتدا ۱۰۰ میکرولیتر نرمال هگزان به متیل استر تهیه شده اضافه گردید و یک میکرولیتر از آن به دستگاه تزریق شد. شناسایی و تعیین مقدار اسیدهای چرب موجود در روغن با سیستم GC/ MASSساخت کارخانه Aglient مدل ۶۸۹۰ ساخت کشور آمریکا مجهز به دتکتور یونی شعله‌ای و ستون شیشه‌ای مویینه CP-SIL-88 به طول ۳۰ متر و قطر ۲۵/۰ میلی‌متر انجام شد. گاز حامل هلیوم و با فشار ۸.۹ psi، تزریق کننده اسپلیت- اسپلیتلس (Split/splitles)، درجه تفکیک آن ۱۰:۱ می‌باشد. دمای تزریق و دتکتور به ترتیب ۲۴۰ و ۲۵۰ درجه می‌باشد. دبی گاز حامل ۱۵ میلی‌لیتر در دقیقه و مقدار تزریق نمونه ۱ میکرولیتر بود. اسیدهای چرب استاندارد مورد استفاده نیز ساخت کشور سیگمای آمریکا بود.
۳-۴. مواد و وسایل (ترشح حلزون)
۳-۴-۱. ترشح حلزون
ترشح مورد استفاده در این بررسی از حلزون هلیکس پوماتیا که از جنگل‌های لاهیجان جمع‌ آوری شده بود بدست آمد. متوسط سن آنها ۱۹ ماه و وزن آنها ۱۰ گرم بود.
جدول ۳-۲. دستگاه‌های مورد استفاده (ترشح حلزون)